Potential of Tetradenia riparia leaf essential oil and its fractions in controlling Aedes aegypti and Rhipicephalus microplus larvae

Tetradenia riparia (Hochst.) Codd (Lamiaceae) is a shrub, commonly known as ginger bush or false myrrh, and several studies have shown that T. riparia exhibits a variety of biological properties. This study aimed to determine the chemical composition of T. riparia essential oil and its fractions, investigate their anticholinesterase activity, and assess their larvicidal activity against the cattle tick Rhipicephalus microplus and the mosquito Aedes aegypti. Eleven essential oil fractions were obtained by fractionation and analyzed by gas chromatography/mass spectrometry. Larvicidal activity against R. microplus and third-instar A. aegypti was assessed using a larval packet test and a larval immersion test, respectively. Anticholinesterase activity was determined by a bioautographic method. Forty-nine compounds were identified in the essential oil, of which the major classes were oxygenated sesquiterpenes (45.95%) and sesquiterpene hydrocarbons (35.20%) and the major components were isospathulenol (17.40%), ß-caryophyllene (15.61%), 14-hydroxy-9-epi-caryophyllene (10.07%), 14-hydroxy-α-muurolene (8.32%), and 9ß,13ß-epoxy-7-abietene (5.53%). Bioassays showed that T. riparia essential oil (LC50 = 1.56 µg/mL) and FR3 (LC50 = 0.30 µg/mL) were the most active against R. microplus and A. aegypti larvae, respectively. The essential oil and FR1, FR2, and FR3 exhibited acetylcholinesterase inhibitory activity. These results indicate that T. riparia essential oil and its fractions hold promise in the development of novel, environmentally safe agents for the control of R. microplus and A. aegypti larvae.

Chemical composition and insecticidal activity of Garcinia gardneriana (Planchon & Triana) Zappi (Clusiaceae) essential oil / Composición química y actividad insecticida del aceite esencial de Garcinia gardneriana (Planchon & Triana) Zappi (Clusiaceae)

The present study aimed to analyze the chemical composition of the essential oil from Garcinia gardneriana (Planchon & Triana) Zappi leaves and fruits, and to determine its acaricidal activity on Rhipicephalus microplusy larval packet test and larvicidal action on Aedes aegyptiby larval immersion test. The chemical analysis of the essential oil by gas chromatography-mass spectrometry identified sesquiterpene hydrocarbons and oxygenated sesquiterpenes in bacupari leaves and fruits, and α-cedrene, α-chamigrene, α-trans-bergamotene, and ß-curcumene as major compounds. Essential oil from leaves of G. gardneriana presented acaricidal activity on R. microplus (LC50= 4.8 mg/mL; LC99= 10.8 mg/mL) and larvicidal effect on A. aegypti (LC50= 5.4 mg/mL; LC99 = 11.6 mg/mL), where as essential oil from the fruits of G. gardneriana showed LC50= 4.6 mg/mL and LC99= 8.9 mg/mL against R. microplus and LC50= 6.4 mg/mL and LC99= 13.9 mg/mL against A. aegypti. These results thus demonstrate the potential acaricidal and larvicidal activity of essential oil of G. gardneriana, offering new perspectives for the realization of bioassays from this essential oil.

El presente estudio tuvo como objetivo analizar la composición química del aceite esencial de las hojas y frutos de Garcinia gardneriana (Planchon & Triana) Zappi, y determinar su actividad acaricida en Rhipicephalus microplus y larvicida en Aedes aegypti empleando la prueba de inmersión de larvas. El análisis químico del aceite esencial por cromatografía de gases-espectrometría de masas identificó hidrocarburos sesquiterpénicos y sesquiterpenos oxigenados en hojas y frutos de bacupari, y α-cedreno, α-chamigreno, α-trans-bergamoteno y ß-curcumeno como compuestos principales. El aceite esencial obtenido de las hojas de G. gardneriana presentó actividad acaricida en la garrapata del ganado (LC50= 4,8 mg/mL; LC99= 10,8 mg/mL) y actividad larvicida en A. aegypti (LC50= 5,4 mg/mL; LC99= 11,6 mg/mL), así como, el aceite esencial obtenido de los frutos de G. gardneriana mostró LC50= 4,6 mg/mL y LC99= 8,9 mg/mL contra las larvas de garrapatas de ganado y LC50= 6,4 mg/mL y LC99= 13,9 mg/mL en las larvas de A. aegypti. Por lo tanto, estos resultados demuestran la actividad acaricida y larvicida del aceite essencial de G. gardneriana, ofreciendo nuevas perspectivas para la realización de bioensayos a partir de este aceite esencial.

Crude extract of the tropical tree Gallesia integrifolia (Phytolaccaceae) for the control of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) larvae / Extracto crudo del árbol tropical Gallesia integrifolia (Phytolaccaceae) para el control de larvas de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

Introduction: Phytoinsecticides are alternatives to control insects in different stages, Gallesia integrifolia (Spreng.) Harms, Phytolacaceae family, popularly known as pau d'alho, garlic tree, and guararema in Brazil, is known due to its strong alliaceous odor because of the presence of sulfur molecules in the plant. This species presents biological activity and potential insecticide effect that is still unexploited. Objective: This study aimed to evaluate the biological activity of the ethanolic crude extract from G. integrifolia leaves, flowers, and fruits on the control of Aedes aegypti third-stage larvae and pupae. Methods: The botanical material was collected in city Umuarama, Paraná, Brazil at the coordinates (23º46'16" S & 53º19'38" WO), and altitude of 442 m, the fruits of G. integrifolia were collected in May and the leaves and flowers in December 2017. The crude extracts of G. integrifolia leaves, flowers, and fruits were prepared by dynamic maceration technique. The chemical composition of the extracts was determined by gas chromatography coupled to a mass spectrometry. The insecticidal activity of the crude extracts of G. integrifolia were carried out on larvae and pupae of A. aegypti in concentrations between 0.001 to 25 000 mg/mL, and afterwards the lethal concentrations that kill 50 % (LC50) and 99.9 % (LC99.9) were determined by probit analysis. Anticholinesterase activity was determined by bioautographic method at concentrations from 0.000095 to 50 mg/mL. Results: The yield of G. integrifolia crude extracts were 8.2, 9.1, and 17.3 % for flowers, fruits, and leaves, respectively. The chemical composition of G. integrifolia extracts was characterized by presence of fatty acid esters, phytosterols, vitamins, oxygenated diterpenes and organosulfur compounds. The flower extract presented the high amount of sulfur compounds (20.2 %) such as disulfide, bis (2-sulfhydryl ethyl) (11.9 %), 2,3,5-trithiahexane (6.2 %), 1,2,4-trithiolane (1.1 %), and 2,4-dithiapentane (1.1 %). Regarding the insecticidal activity, flower extract showed highly active with LC99.9 of 0.032 mg/mL and LC99.9 of 0.969 mg/mL on A. aegypti larvae and pupae, respectively, and the highest inhibition of acetylcholinesterase enzyme (0.00019 mg/mL) ex situ. The flower extract presented anticholinesterase and larvicide activity, respectively, 12.8 % and 35.6 % greater than the control temephos. Conclusions: This study opens new perspectives on the use of extracts from G. integrifolia as a bioinsecticide alternative for the control of A. aegypti larvae and pupae.

Introducción: Los fitoinsecticidas son alternativas para el control de insectos en diferentes etapas, Gallesia integrifolia (Spreng.) Harms, familia Phytolacaceae, conocida popularmente como pau d'alho, árbol de ajo y guararema en Brasil, es conocida por su fuerte olor aliáceo debido a la presencia de moléculas de azufre en la planta. Esta especie presenta actividad biológica y potencial efecto insecticida que aún no está explotado. Objetivo: El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad biológica del extracto crudo etanólico de las hojas, flores y frutos de G. integrifolia en el control de las larvas y pupas de la tercera etapa de Aedes aegypti. Métodos: El material botánico fue recolectado en la ciudad de Umuarama, Paraná, Brasil (23º46'16" S & 53º19'38" W), a una altitud de 442 m y los frutos de G. integrifolia fueron recolectados en mayo de 2017 y las hojas y flores en diciembre del mismo año. Los extractos crudos de hojas, flores y frutos de G. integrifolia se prepararon por técnica de maceración dinámica. La composición química de los extractos se determinó por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas. La actividad insecticida de los extractos crudos de G. integrifolia fue evaluada en larvas y pupas de A. aegypti en concentraciones entre 0.001 a 25 000 mg/mL, y las concentraciones letales que matan 50 % (CL50) y 99.9 % (CL99.9) de larvas fueron determinados por análisis de probit. La actividad anticolinesterasa fue evaluada por método bioautográfico en concentraciones de 0.000095 a 50 mg/mL. Resultados: El rendimiento de los extractos crudos de G. integrifolia fue de 8.2, 9.1 y 17.3 % para flores, frutos y hojas, respectivamente. La composición química de los extractos de G. integrifolia se caracterizó por la presencia de ésteres de ácidos grasos, fitosteroles, vitaminas, diterpenos oxigenados y compuestos organosulfurados. El extracto de las flores presentó alta cantidad de compuestos de azufre (20.2 %) como disulfuro, bis(2-sulfhidril etilo) (11.9 %), 2,3,5-tritiahexano (6.2 %), 1,2,4-tritiolano (1.1 %) y 2,4-ditiapentano (1.1 %). En relación con la actividad insecticida, el extracto de las flores mostró una gran actividad con CL99.9 de 0.032 mg/mL y CL99.9 de 0.969 mg/mL en larvas y pupas de A. aegypti, respectivamente, y la inhibición más alta de la enzima acetilcolinesterasa (0.00019 mg/mL) ex situ. El extracto de las flores presentó actividad anticolinesterasa y larvicida, 12.8 y 35.6 %, respectivamente, mayor que el control temephos. Conclusiones: Este estudio abre nuevas perspectivas sobre el uso de extractos de G. integrifolia como alternativa bioinsecticida para el control de larvas y pupas de A. aegypti.

Larvicidal activity of piperovatine and dichloromethane extract from Piper corcovadensis roots against mosquitoes Aedes aegypti L / Actividad larvicida de piperovatina y extracto de diclorometano de las raíces de Piper corcovadensis contra mosquitos vectores del dengue Aedes aegypti L

The research of new substances capable of controlling the Aedes aegypti mosquito is urgent due to the increase in the transmission of the diseases such as dengue, chikungunya and Zika virus by the vector. Thus, the aim of this study was to evaluate the larvicidal activity of crude extract of Piper corcovadensis roots, a native plant from Brazil, and of the isolated compound piperovatine against larvae of A. aegypti by the larval immersion test. The lethal concentration that killed 50% (LC50) and 99% (LC99) of larvae was determined by Probit analysis. The results indicated high larvicidal activity on A. aegypti larvae for crude extract of Piper corcovadensis roots with LC50 of 4.86 µg/mL and LC99 of 15.50 µg/mL and piperovatine with LC50 of 17.78 µg/mL and LC99 of 48.55 µg/mL. This work opens new perspectives to the development of future products with crude extract of Piper corcovadensis roots and piperovatine that can be applied to mosquito control.

La investigación de nuevas sustancias capaces de controlar el mosquito Aedes aegypti es urgente debido al aumento en la transmisión de enfermedades como el dengue, el chikungunya y el virus Zika por el vector. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue evaluar la actividad larvicida del extracto crudo de las raíces de Piper corcovadensis, una planta nativa de Brasil, y del compuesto aislado piperovatine contra larvas de A. aegypti mediante la prueba de inmersión larvaria. La concentración letal que mató al 50% (LC50) y al 99% (LC99) de larvas se determinó mediante análisis Probit. Los resultados indicaron una alta actividad larvicida en larvas de A. aegypti para extracto crudo de las raíces de Piper corcovadensis con LC50 de 4.86 µg/mL y LC99 de 15.50 µg/mL y piperovatine con LC50 de 17.78 µg/mL y LC99 de 48.55 µg/mL. Este trabajo abre nuevas perspectivas para el desarrollo de futuros productos con extracto crudo de las raíces de Piper corcovadensis y piperovatine que pueden aplicarse al control de mosquitos.

Ocurrencia de escuticociliatosis en el lenguado Paralichthys adspersus causado por Miamiensis avidus, en Perú / Occurrence of scuticociliatosis in the flounder Paralichthys adspersus caused by Miamiensis avidus, in Peru

La escuticociliatosis es una enfermedad causada por ciliados del orden Scuticociliatida los cuales se caracterizan por su alto potencial para invadir al huésped, significando un serio problema en la acuicultura marina. El presente trabajo describe la infección con escuticociliados en lenguado Paralichthys adspersus en cautiverio. Los signos externos e internos de la infección incluyen zonas necróticas en el tegumento, abundante mucosidad, abultamiento de la cavidad visceral con acumulación de líquido ascítico, necrosis de las fibras musculares, licuefacción del cerebro, entre otros. Se identificó y caracterizó molecularmente al parásito ciliado como M. avidus, utilizando secuencias de gen mitocondrial citocromo oxidasa I (COI), y de los genes nucleares β-tubulina y la región de la subunidad menor rRNA 18S, mostrando una sinonimia con P. dicentrarchi. Todas las lesiones estuvieron invadidas de ciliados. A nivel histológico, se detectaron ciliados en casi todos los tejidos siendo el cerebro el órgano más parasitado. Los ejemplares infectados, acompañados de infecciones bacterianas secundarias predominantemente por Vibrio alginolyticus, después de un periodo de letargia mueren.

The Scuticociliatosis, a disease caused by ciliates from the order Scuticociliatida characterized by their high potential to in vade the host, is a serious problem in marine aquaculture. This paper describes scuticociliatosis infection in farmed flounder Paralichthys adspersus. External and internal signs of infection include necrotic areas in the tegument, abundant mucus, swelling of the visceral cavity with ascitic fluid accumulation, necrotic muscle fibers and brain liquefaction, among others. The ciliate parasite was molecularly identified and characterized as M. avidus, using sequences of mitochondrial gene cytochrome oxidase I (COI), and nuclear genes β-tubulin and the region of the small subunit 18S rRNA, showing synonymy with P. dicentrarchi . All lesions were infested by ciliates. Histologically, ciliates are detected in almost all tissues being the brain the organ more parasitized. The infected specimens associated with secondary bacterial infections, predominantly Vibrio alginolyticus, died after a lethargy period.

Accidentes ocupacionales en personal que labora en clínicas y consultorios de animales de compañía, Lima 2010 / Ocupational injuries among Veterinarians in Peru

La práctica veterinaria es considerada como una actividad de alto riesgo y la posibilidad de sufrir daños a la salud producto de accidentes ocupacionales es latente. Objetivo: identificar los accidentes ocupacionales asociados a la actividad laboral de los profesionales que laboran en consultorios y clínicas veterinarias de animales de compañía en la ciudad de Lima durante el año 2010. Metodología: Se elaboró y aplicó una encuesta semi estructurada a Médicos Veterinarios y personal técnico que laboraban en estos lugares, para identificar datos generales de los accidentes producidos durante la actividad laboral y una percepción acerca de este problema por parte de los encuestados. Resultados y Conclusiones: Se encuestaron a 400 personas. La edad y tiempo de experiencia en la actividad fue de 29.3 (18-63) y 5.5 (1-40) años en promedio, respectivamente. El 55% fueron varones y 45% mujeres. El 80.8% sufrieron al menos un accidente en el 2010. Los accidentes más frecuentes producidos por animales fueron mordeduras (31.1%) y arañazos (26.6%); y los producidos por elementos inanimados fueron pinchazos (21.5%) y cortes (8.7%). Los manos (68.9%) y brazos (20.2%) fueron las regiones anatómicas más afectadas y las cicatrices la secuela más común (49.9%). El 44.5% reportó problemas musculo esqueléticas en espalda, cuello y/o extremidades. El área de trabajo fue considerada cómoda para el 89% y seguras para el 79% de los trabajadores. Se hace necesario capacitar a los trabajadores de esta área sobre prácticas de seguridad y bioseguridad en el ambiente laboral.

Veterinary practice is considered as a high-risk activity and the possibility of suffering any health injury due to occupational accidents is latent. Aim: To identify worked-related accidents in professionals who labor in animal centers and veterinary clinics of small animals in Lima city during 2010. Methods: A semi-structured survey was elaborated and applied among 400 Veterinarians and technicians who worked in these places, gathering general information of the accidents produced during work activity and the perception of this problematic among them. Results and Conclusions: The age and experience time in this type of work was 29.3 (18-63) and 5.5 (1-40) years old on average, respectively. 55% of the respondents were males and 45% females. At least 80.8% had an injury during 2010. The work-related accidents most frequently produced by animals were bites (31.1%) and scratches (26.6%); also lesions produced by inanimate elements were pinch (21.5%) and cuts (8.7%). Hands (68.9%) and arms (20.2%) were the anatomic regions most affected, and scars were the most commonly sequel reported (49.9%). 44.5% of the respondents reported musculoskeletal problems on back, neck and/or extremities. The work environment was indicated as comfortable for the 89.0% of people surveyed and secure for the 79.0% of workers. There is a need to train workers in the area of environmental health and safety.

Accidentes por mordedura canina, casos registrados en un hospital de niños de Lima, Perú 1995 - 2009 / Dog bite accidents in a children hospital at Lima, Peru. Retrospective study from 1995 - 2009

Entre 1995 a 2009 se registraron 206 hospitalizaciones en el Instituto Nacional de Salud del Niño debido a accidentes por mordedura canina. La mediana de edad de los pacientes fue cuatro años y para los días de hospitalización tres. El 61,7 por ciento fueron varones. Los accidentes ocurrieron en el domicilio de una tercera persona (39,3 por ciento), en vía pública (33,5 por ciento) y en el domicilio del agredido (27,2 por ciento). El 66,5 por ciento de los episodios fueron precedidos por un estímulo del niño y el 88,8 por ciento causado por animales reconocidos por los lesionados. El 34,0 por ciento reconoció la raza del animal (52,9 por ciento animales cruzados). El 79,1 por ciento fueron lesiones múltiples y la región anatómica más afectada fueron la cabeza y cuello (79,1 por ciento). Se registraron complicaciones en un 20,4 por ciento y secuelas estéticas en el 94,7 por ciento. Las mordeduras caninas afectan la salud física de los niños.

From 1995 to 2009, 206 cases of dog bites were recorded among hospitalized patients at the Children National Health of, Lima-Peru. The median of age was 4 years, and for hospitalization time was 3 days. Most patients were males (61.7 percent). The bites occurred in the house of a third person (39.3 percent), on the street (33.5 percent), or in the victim’s house (27.2 percent). A 66.5 percent of the bites were provoked and 88.8 percent were from animals known to the victim. The dog breed was recognized in 34 percent (52.9 percent were mongrel dogs). Multiple lesions were identified in 79.1 percent, and the most frequently bitten areas were head and neck (79.1 percent). Complications were reported in 20.4 percent and aesthetic sequelae in 94.7 percent.

Características clinicas y epidemiológicas de pacientes menores de 5 años con diarrea aguda infecciosa y coprocultivo positivo a enteropatógenos bacterianos en el Instituto Nacional de Salud del Niño, en los años 2007-2008 / Clinical and epidemiological characteristics of patients under 5 years with acute infectious diarrhea and positive stool culture enteropathogens in the National Institute of Child Health, in 2007-2008

Objetivo: Conocer las características clínicas y epidemiológicas de los pacientes de menores de 05 años, que durante los años 2007 y 2008, hayan sido diagnosticados con diarrea aguda infecciosa y cuyo coprocultivo haya resultado positivo para algún enteropatógeno, en el Instituto Nacional de Salud del Niño. Metodología: Este es un estudio descriptivo retrospectivo. Luego de recolectar los resultados positivos obtenidos de todos los coprocultivos hechos a pacientes menores de 05 años en los años 2007 y 2008, se procedió a analizar las respectivas historias clínicas para hallar su relación con el resto de variables, que incluyen género, edad, hospitalización, antecedentes epidemiológicos (crianza de animales, servicios completos y lactancia materna exclusiva) y deshidratación. Los resultados fueron evaluados de acuerdo a medidas de resumen y variabilidad. Conclusiones: Campylobacter sp. fue el agente etiológico más prevalente para el total de la muestra, con el 41,5 por ciento de los casos. El 14,4 por ciento de pacientes criaban animales; 13,6 por ciento no tenía servicios completos (luz, agua, desagüe) y 19,1 por ciento no tuvo lactancia materna exclusiva. La deshidratación estuvo presente en 76 pacientes, lo que representa al 32,2 por ciento de la muestra. Un 28,4 por ciento de pacientes tuvo la necesidad de hospitalización